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廣州生物院成功培育可發四種熒光的克隆豬
廣州生物院成功培育出一種特殊的轉基因克隆豬,這種克隆豬在特定波長的激發光下可分別發出紅、黃、綠、青4種熒光,這是國際上首次獲得能夠同時表達四種熒光蛋白的轉基因克隆豬。
該成果是廣州生物院在賴良學博士的領導下,與南方醫科大學顧為望教授以及華南農業大學吳珍芳教授合作共同完成的。研究組通過電穿孔的方法將編碼紅色熒光蛋白、黃色熒光蛋白、綠色熒光蛋白以及青色熒光蛋白的四種基因同時轉入長白豬胎兒成纖維細胞,然後用表達四種熒光蛋白的細胞進行體細胞克隆,將克隆胚胎移入的代孕母豬體內,最終獲得11頭轉基因克隆豬。目前,8頭轉基因克隆豬已健康成長一年多,並開始繁殖下一代。該研究成果於2011年5月13日發表於國際著名期刊PLoS ONE(PLoS ONE 6(5): e19986. doi:10.1371/journal.pone.0019986)。
目前,體細胞克隆技術是生產轉基因大動物最有效的途徑,但受體細胞增殖能力有限的影響,在此之前的研究中,每一輪克隆隻能轉入一個外源基因。賴良學博士領導的課題組經過潛心研究,利用2A短肽序列巧妙地將不同的熒光蛋白基因連在同一個載體上,從而隻通過一輪動物克隆即成功獲得了含多個外源轉基因的克隆豬,不僅克服了體細胞多基因轉移的技術障礙,而且實現了多基因在高水平上的協同表達。
眾所周知,豬是人類組織、細胞和器官異種移植最有前途的供體,克隆豬表達的熒光蛋白為追蹤豬組織、細胞和器官在受者體內存活和機能狀況提供了重要的標識,因此,就表達四種應光蛋白的克隆豬本身而言,它將成為異種移植研發的理想動物模型。
該項研究成果的取得,標誌著我國轉基因克隆豬技術達到了國際領先水平,該項成果的運用,將極大地促進含多種優良性狀的轉基因克隆豬的研究與產業化,為今後加速我國對豬的遺傳性狀進行轉基因改良,提高其生產性能,並製作用於人類疾病動物模型以及作為人類器官移植供體的的轉基因豬研究奠定了基礎。