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廣州健康院開發基於CRISPR/Cas的多模態通用報告器檢測葡萄球菌
近日,betway体育下载 李誌遠團隊在學術期刊analytical chemistry上發表了題為A Rationally Designed CRISPR/Cas12a Assay Using a Multimodal Reporter for Various Readouts的研究成果。文章展示了一種基於CRISPR/Cas係統的新型檢測方法CAMURE,通過應用於檢驗葡萄球菌腸毒素A標誌物,驗證了CAMURE比DETECTR檢測具有更高的靈敏度和特異性,具有廣泛的臨床和生物應用價值。
金黃色葡萄球菌是一種常見的食源性致病微生物,其產生的葡萄球菌腸毒素(staphylococcal enterotoxins,SEs)具有高熱穩定性和蛋白酶抗性。常用的檢測SEs的方法為免疫分析法和聚合酶鏈反應法,但這兩種方法周期長、成本高昂、易受儀器限製,不利於大範圍推廣應用。
本項研究首次揭示了一種基於Cas12a的新型多模態通用報告器(CAMURE)。使用新開發的CAMURE檢測葡萄球菌腸毒素,檢測結果顯示其與已報道的傳統報告器相比增強了10倍的靈敏度,並且配合多模式讀數,可以傳達出與傳統報告器相同的診斷結果。同時,該研究中新研發的CAMURE可以通過簡單地重新編程引導RNA來檢測所有基因編碼的SEs,也可以應用於其他感染和疾病生物標誌物的檢測。該研究還進一步提出了一種快速的DNA提取方法,通過使用Triton X-100溶液在2-5分鍾內從牛奶樣品中提取出高質量的DNA,而無需使用商業提取試劑盒,該方法能夠擴展到其他基因編碼的疾病標誌物檢測。
該研究為快速準確檢測葡萄球菌腸毒素提供了新方案,並且為更多病原菌的檢測提供了可能。總的來說,該技術能夠有效整合到當地衛生保健係統中,將其影響擴大到衛生條件落後的人群。尤其在先進實驗基礎建設有限的地區,即時診斷在改革醫療保健方麵有巨大的前景。該方法可以通過重新設計crRNA來檢測其他基因編碼的腸毒素和其他感染和疾病標誌物,包括傳染性和非傳染性的病原體(如瘧疾、HIV和COVID-19)和癌症篩查,具有廣泛的臨床和生物應用價值。
廣州健康院Jean de Dieu Habimana為該論文的第一作者,廣州健康院李誌遠研究員為該論文通訊作者。該研究成果得到了湖南省重點研發計劃、廣東省自然科學基金、湖南省自然科學基金等項目資助。
CAMURE檢測原理