betway体育下载 的實驗室裏小鼠獨立透氣籠裏的小白鼠。　　

　　實驗人員將小鼠取出透氣籠。

　　南方醫院、省人民醫院、中山大學附屬腫瘤醫院等廣東省內的多家醫院，正在開展實體瘤、白血病等疾病的臨床前研究。被科研人員研究的“病人”有點特殊，是一群經過特別培養的小鼠。這些小鼠幾乎沒有免疫能力，而且要在體內“重現”肺癌細胞以及免疫細胞。這些幫人類試藥的小鼠，來自betway体育下载 ，是國內唯一具有自主知識產權的第三代免疫缺陷小鼠。

國外第三代小鼠“當時不對中國出售”

　　科研界曾將小鼠體內的某些基因特異性敲掉，導致其T淋巴細胞缺失。這種小鼠，免疫功能很弱，就是很容易得病。基礎醫學研究人員，嚐試讓這種小白鼠得上人類會得的病，再在這種小鼠上測試不同的治療方法。

　　隨後，科學家又在B淋巴細胞上“做手腳”，小鼠免疫功能更差了，改進後B、T細胞都缺陷的小鼠模型，被稱為第二代免疫缺陷小鼠。雖然B、T細胞都不起作用了，但還有一類N K細胞可以發揮免疫功能，因此這種小鼠還不是最理想的免疫缺陷小鼠。

　　在本世紀初，日本和美國培養出了三類免疫細胞都缺失的小鼠。彼時，李鵬從英國劍橋大學回國後，進入betway体育下载 華南幹細胞與再生醫學研究所。當時，他試圖購買國外的第三代免疫缺陷小鼠做實驗。但悲劇的是，多番努力後，都未能如願。因為國外的這些小鼠都不對中國出售。這意味著，想要用國外的第三代小鼠進行研發、轉化根本不可能。李鵬試圖打破“壁壘”，培養出自己的第三代免疫缺陷小鼠NSI品係。

鎖定基因進行敲除 第三代小鼠在廣州誕生

　　要徹底去除NK細胞，首先需要找到對NK細胞發育起關鍵調節作用的基因，隨後利用基因編輯技術，“對目的DNA片段敲除或加入，造成目的基因功能缺失。”2010年，TALEN基因敲除技術興起，這給李鵬研究團隊帶來了基因敲除的契機。多番嚐試後，團隊鎖定了“IL2rg”這個基因，“這個基因對B、T和NK細胞的發育有關鍵作用，敲掉後，N K細胞就發育不下去了。”該團隊肖毅仁博士說。

　　隨後，團隊直接在第二代小鼠體內，敲掉了這個基因，使得這三種淋巴細胞發育被阻斷了。“把敲除載體注射到受精卵裏，由於這個載體隨身帶了個‘剪刀’，可以特意性地剪斷目的基因，結果是基因組在修複過程中，通過外加的錯誤模版把一些錯誤信息導入到了目的基因的地方，使得目的基因無法恢複成原來正常狀態，無法正常工作，最終達到敲除目的基因的目的。”動物管理人員解釋。

　　接下來，被“修飾”後的受精卵被移植到小鼠體內。懷胎近21天後，經過連續三代的培育，第三代免疫缺陷純合子小鼠正式誕生。這類小鼠幾乎沒有免疫能力。據介紹，這是國內唯一具有自主知識產權的第三代免疫缺陷小鼠。

移植成功率提高30%小鼠體內長出膀胱瘤

　　肖毅仁介紹，通過檢驗，第二代免疫缺陷小鼠移植病人原代腫瘤成功率在30%到40%之間，而第三代可以能達到60%到70%。“所謂移植成功率更高，指的是病人的組織或細胞在第三代小鼠裏成長更容易。”而且，越來越多的科研報道證明，病人的腫瘤能否在第三代免疫缺陷小鼠中成瘤，還可以用來預測腫瘤的惡性程度。

　　廣州生物院和廣州中醫藥大學的合作確實顯示，以往在第二代小鼠裏無法生長的膀胱癌，現在在第三代小鼠裏卻長出來了。李鵬也說，以往的小鼠模型，均一性都不夠好，“把腫瘤植入，殘留的免疫係統會排斥掉部分腫瘤細胞，有的小鼠腫瘤長得大，有的長得小。而第三代小鼠幾乎沒有免疫係統，腫瘤長得都差不多大，那就可以隨機分配，一組給藥，一組不給藥，更好地評估藥物的效果。”

　　第三代免疫缺陷小鼠，也可助力現今最流行的“精準醫療”。試想下，一個癌症患者，興許可以把自己的疾病，甚至加上免疫係統，都往小鼠身上“搬”，然後通過小鼠來篩選，我們就可以知道什麼藥物組合最適合自己。每個癌症患者都有個體差異，用小鼠來精準“試錯”，這可能都不是夢。“當然，目前國內對這個領域的政策還很模糊。”肖毅仁說。

揭秘

成本：千餘隻小鼠去年花了上百萬

　　據南都記者了解，“免疫缺陷小鼠”的研究團隊共有十幾個人，這一團隊從2011年開始研究，到2013年才成功培育出第一隻基因缺陷小鼠。在廣州生物院的動物房，住著千餘隻小白鼠，它們三三五五地結伴，呆在同一個籠子裏。或安靜，或活潑。因為飼料在頭頂，不能跟排泄物混合，餓了的小老鼠，會一直蹦跳著朝上覓食。同伴多是一母同胎，不然容易打架。而且，住一起的要麼都是“兄弟”，要麼都是“姐妹”，“8周後它們性成熟了會交配，所以會把它們隔離開。”動物房管理人員說。

　　這些小鼠養了後怎麼使用？既可以跟醫院合作進行研究，分享研究成果。同時，也能針對不同研究需求提供“定製式”技術服務。“我們三成到四成的經費都花在飼養上。去年養殖千餘隻小鼠的經費有100萬元左右。而一個醫療項目，如果做得有說服力，至少要100、200隻小鼠吧。”李鵬說。

環境：房間“無特定病原體”實驗員發燒禁止入內

　　小白鼠的生活環境可不簡單，它們住在“無特定病原體”的房間裏，溫度保持在20到24攝氏度，濕度40%到70%。住的獨立送風隔離籠子，流入的空氣要經過過濾，呼出的廢氣也要通過其他管道排出。不管誰進房間，都要換上防護服，戴口罩、手套，隻把眼睛露在外麵，還要通過空氣淋浴消毒。就連小鼠吃的食物，也要經過高壓滅菌。“實驗員感冒發燒了的話，會被禁止進入。”李鵬說，之所以這麼嚴格，是因為小鼠在免疫能力上有缺陷，一不小心，可能就生病了，而這種獨特的保護環境，能讓小鼠更舒適。

　　有的小白鼠喜歡玩水。小鼠住的籠子，本來是一周要更換一次。但是有的小鼠愛玩水，一兩天，水籠就會被它玩淹了，實驗員得時刻觀察，髒了就要盡快更換籠子。有的小鼠在換籠時，還會和飼養員玩起捉迷藏，躲避鑷子的“捕捉”，一會在籠子裏狂奔，一會又跳到籠邊，不亦樂乎。小白鼠也有脾氣。有時，小鼠並不太安分，跳來跳去，煩躁不安時，實驗員還得拿玩具哄它逗它。小白鼠有時還厭食。這時，實驗員會拿點特別的零食，比如雞蛋、瓜子，當然，是消毒後的，喂給小鼠吃。

工作：實驗員兼職外科醫生向小鼠移植癌細胞

　　實驗室的小白鼠最重要的使命則是獻身科學，為人類試錯。從醫院獲取腫瘤組織後，為了讓小鼠也患癌，實驗員有時還得充當“外科醫生”，為它做外科手術。

　　通常，小鼠麻醉後，實驗員會局部剪開小鼠皮膚和腹膜，在目的器官的外膜剪個小口，將腫瘤組織通過移植軟管移植到目的器官，再用激光筆閉合傷口，止血，縫合皮膚和腹膜，最後等到小鼠在37℃恒溫台上蘇醒後，再放入飼養籠裏。在這之後，實驗員通過觸摸，使用遊標卡尺測量，判斷腫瘤有否長大。“當然，腫瘤長到1.5立方厘米後，會通過手術，將腫瘤組織取出進行檢測。”

　　出品：南方都市報科學新聞工作室

　　主持：陳養凱

　　采寫：南都記者 陽廣霞 通訊員 黃博純

　　攝影：南都記者 譚慶駒

原載於《南方都市報》2017年1月6日科學版鏈接