科技日報記者葉青 通訊員 黃博純

　　據betway体育下载 最新消息，該院賴良學研究員課題組首次構建了新型條件性表達Cas9基因工具豬模型，利用此模型，率先實現了直接對成體大動物進行體內基因編輯，並首次建立了大動物原發性肺癌模型。最新研究成果於11月16日在線發表在《基因組研究》上。

　　由於豬在器官結構、大小以及生理代謝、免疫係統等方麵與人接近，被普遍認為是理想的大動物疾病模型、異種器官移植供體模型和異種器官再造受體模型。但要獲得這些模型，需要對豬進行基因組編輯。目前，對豬等大動物在體內直接進行基因突變，技術上尚不可行。

　　豬的基因組編輯主要依賴於受精卵注射或體細胞核移植技術來實現。通過前者技術建立的基因編輯動物易產生嵌合體，且需繁殖到第二代，甚至第三代，花2-3年的時間才能夠獲得；後者技術製備的基因編輯大動物模型，受多種不可控因素影響，體細胞克隆成功率非常低，同樣耗時、耗力，且成本極高。 該課題組利用基因打靶技術，成功地將能夠剪開基因的Cas9蛋白基因插入到豬基因組的一個特定位點，相當於在豬體內加入一把基因剪刀，並且在Cas9基因附近加上了能與Cre重組酶結合的loxp位點，後者相當於一個開關，能對其剪切功能的開啟加以控製。他們利用此工具模型，不需要依賴受精卵注射或體細胞核移植技術，在動物體內轉入能識別特定基因的gRNA和重組酶，就可直接對豬的基因組進行編輯，從而快速獲得相應基因編輯豬模型。

　　課題組還將含有Cre重組酶和靶向六種腫瘤相關基因的gRNAs慢病毒通過滴鼻方式，感染工具豬的肺髒，在豬肺細胞的基因組發生癌化突變。三個月後，豬出現了典型的肺癌症狀和病理變化，從而成功地建立了原發性肺腫瘤大動物模型。

　　利用條件性表達Cas9基因豬模型，可高效的實現大動物體內細胞單基因、多基因、超大片段基因的編輯。這一研究成果將推動豬基因功能的研究進展和加快在生物醫藥、農業領域的基因修飾豬模型建立。